一、沃特斯色譜柱的存放:
1.避免干燥存放
色譜柱在使用后或長時間不使用時,不能直接暴露在空氣中,否則會導致填料干燥、開裂或失效。
應將色譜柱充滿保存溶劑(通常為甲醇、乙腈或水,具體根據柱型而定),并密封柱兩端。
2.選擇合適的保存溶劑
反相色譜柱(如C18柱):保存溶劑通常為甲醇或乙腈(純有機溶劑),避免使用純水(可能滋生微生物)。
正相色譜柱(如硅膠柱):保存溶劑通常為正己烷或庚烷。
特殊柱型:參考柱廠商推薦的保存溶劑(如離子交換柱需保存在特定pH的緩沖液中)。
3.溫度控制
存放環境應避免高溫或低溫極*條件,推薦溫度為室溫(15~25℃)。
長期存放時,可置于陰涼處,避免陽光直射。
4.密封保存
使用專用柱帽或封口裝置密封色譜柱兩端,防止保存溶劑揮發或污染。
若色譜柱自帶密封閥,確保閥門處于關閉狀態。
1.沖洗色譜柱
每次使用后:用適當的溶劑沖洗色譜柱,清除殘留樣品或雜質。
反相柱:先用甲醇-水(50:50)沖洗,再用純甲醇或乙腈沖洗。
正相柱:用正己烷或異丙醇沖洗。
長期存放前:確保色譜柱內無鹽分、緩沖液或強極性樣品殘留,避免填料污染或堵塞。
2.避免壓力沖擊
使用色譜柱時,緩慢調節流速和壓力,避免突然升高壓力導致填料壓縮或損壞。
避免在高壓下直接進樣,建議使用樣品預過濾器。
3.防止污染
確保流動相和樣品經過過濾(0.22μm或更小孔徑濾膜),避免顆粒物堵塞色譜柱。
定期更換流動相,避免微生物滋生(可添加適量防腐劑如疊氮鈉)。
4.控制pH范圍
硅膠基色譜柱(如正相柱)對pH敏感,避免使用強酸性或強堿性流動相(通常pH范圍為2~8)。
反相柱對pH耐受性較好,但長期使用極*pH仍可能損傷填料。
5.避免高濃度鹽或緩沖液
高濃度鹽或緩沖液可能沉積在填料表面,導致柱效下降。使用后應及時用純水或有機溶劑沖洗。
