沃特斯色譜柱常見問題與解決方法:
1.柱壓升高
原因:填料堵塞、樣品殘留或污染。
解決方法:反向沖洗色譜柱,或用適當溶劑清洗;若柱壓持續升高,可能需要更換色譜柱。
2.峰形變寬或分裂
原因:填料損壞、污染或流動相不合適。
解決方法:檢查流動相組成,清洗或再生色譜柱。
3.保留時間變化
原因:固定相流失或污染。
解決方法:用純溶劑沖洗色譜柱,必要時進行柱再生。
4.微生物滋生
原因:水相流動相長期存放導致霉菌生長。
解決方法:添加防腐劑(如0.01%疊氮鈉),或定期用有機溶劑沖洗。
1.柱再生
根據柱型選擇適當的再生方法:
反相柱:用純甲醇或乙腈沖洗,去除疏水性雜質。
正相柱:用正己烷或異丙醇沖洗,去除親水性雜質。
若柱效顯著下降,可嘗試用廠商推薦的再生程序(如高溫沖洗或酸堿處理)。
2.修復輕微污染
對于輕微污染的色譜柱,可用以下方法修復:
反相柱:用甲醇-水(10:90)混合液沖洗。
正相柱:用氯仿或甲醇沖洗。
3.及時更換老化柱
若色譜柱性能嚴重下降(如峰形畸變、保留時間不穩定等),建議更換新柱,避免影響實驗結果。
沃特斯色譜柱使用注意事項:
1.嚴格遵守操作規范
避免超過色譜柱的最大耐壓、溫度或pH范圍。
進樣前確保樣品清澈無顆粒。
2.記錄使用情況
記錄色譜柱的使用次數、流動相組成、樣品類型等信息,便于追蹤性能變化。
3.定期維護
每月檢查色譜柱性能(如測試標準品保留時間和峰形),及時發現問題。
